概述
嗜酸性食管炎（EoE）是一种慢性过敏性疾病，其特征为食管上皮重塑、屏障功能障碍及炎症反应。本研究首次揭示，转录因子FOXM1是嗜酸性粒细胞性食管炎（EoE）中IL-13驱动下食管上皮发生重塑和屏障功能障碍的关键调控因子。通过小分子抑制剂RCM-1靶向FOXM1，可显著逆转上皮异常增殖、恢复细胞分化、改善屏障功能，并减少炎症，为EoE治疗提供了全新的“上皮-免疫”双靶向策略。
关键词：上皮分化 上皮增殖 食管疾病 食管炎 类器官
研究背景与实验目的
核心问题：嗜酸性粒细胞性食管炎（EoE）是一种由Th2型免疫反应驱动的慢性过敏性疾病，其关键特征是食管上皮重塑（基底细胞增生、分化障碍）和屏障功能受损。
关键细胞因子：IL-13是EoE病理过程中最主要的效应细胞因子。它不仅能趋化嗜酸性粒细胞，还直接诱导上皮细胞发生一系列病理改变。
研究切入点：FOXM1是调控细胞增殖的关键转录因子，在过敏性疾病中扮演重要角色，但其在EoE食管上皮中的作用尚不明确。
研究目的：探究FOXM1在IL-13诱导的EoE上皮损伤中的作用，并评估靶向FOXM1作为治疗策略的潜力。
主要实验技术路线
临床样本分析：
收集活动期EoE、非活动期EoE及非EoE对照的食管活检组织。
通过RNA测序、qRT-PCR、免疫组化分析FOXM1的表达与定位。
体外细胞与类器官模型：
细胞模型：使用正常人食管上皮细胞（EPC2-hTERT）及患者原代细胞；
三维类器官模型：构建患者来源的食管类器官（PDOs）和EPC2-hTERT来源的类器官；
核心刺激：使用重组人IL-13 (10 ng/mL) 模拟EoE炎症微环境；
干预手段：使用RCM-1（小分子FOXM1抑制剂）、siRNA敲低FOXM1、过表达FOXM1。
功能与机制实验：
屏障功能：气-液界面（ALI）培养，测量跨上皮电阻（TEER）；
增殖与分化：WST-1增殖实验、流式细胞术（细胞周期分析）、免疫荧光检测分化标志物（IVL, FLG）和增殖标志物（Ki-67, TP63）；
分子机制：RNA测序 + 染色质免疫沉淀（ChIP）寻找FOXM1的直接靶基因（发现为CCNB1）。Western Blot检测IL-13/STAT6/PI3K-AKT信号轴。
体内动物模型：
使用小鼠EoE模型（卵清蛋白/IL-13诱导）。
RCM-1治疗性干预（造模后给药）和预防性干预（造模同时给药）。
评估食管组织嗜酸性粒细胞浸润、上皮形态、相关蛋白表达。
核心结果
FOXM1在活动期EoE中高表达：
与对照组相比，FOXM1 mRNA和蛋白水平在活动期EoE患者食管活检组织中显著升高，且定位于基底上皮层，表达水平随着疾病缓解而下降。
图1：活动性嗜酸性食管炎（EoE）患者体内的 FOXM1 表达水平显著升高。
IL-13可诱导FOXM1表达增加：
从活动性和非活动性食管嗜酸性粒细胞性食管炎（EoE）患者体内分离的食管上皮培养物显示，IL-13可上调FOXM1的表达。同时，qRTPCR检测也显示相同结果。与患者活检结果类似，类器官的免疫组织化学染色显示FOXM1定位于基底上皮，且在IL-13刺激后其表达水平升高。
图2：食管上皮中，IL-13 刺激可上调 FOXM1 的表达。
RCM-1抑制FOXM1可治疗IL-13诱导的上皮损伤：
恢复分化：使用RCM-1或siRNA抑制FOXM1后，IL-13诱导的下调分化标志物（IVL, FLG）得到恢复；
抑制增殖：FOXM1抑制减少了IL-13诱导的基底细胞增生和Ki-67阳性细胞数；
修复屏障：在ALI培养中，RCM-1成功阻止了IL-13导致的跨上皮电阻（TEER）下降，表明屏障功能得到保护。
图3：采用 RCM-1 抑制 FOXM1，可消除IL-13 刺激所致的食管上皮损伤。
图4：抑制 FOXM1 可防止 IL-13 刺激所导致的上皮屏障完整性受损。
体内实验验证：
在小鼠EoE模型中，RCM-1治疗不仅减轻了食管上皮的病理改变（基底细胞增生、分化不良），还显著减少了嗜酸性粒细胞趋化因子CCL26的表达。
图5：抑制 FOXM1 可减轻小鼠嗜酸性食管炎（EoE）模型中的上皮损伤与炎症反应。
图6：在 IL-13 刺激条件下，RCM-1 可抑制 STAT6 磷酸化及嗜酸粒细胞趋化因子 - 3（eotaxin-3）的表达。
FOXM1参与机制阐明：
FOXM1通过直接结合并转录调控细胞周期蛋白B1（CCNB1），驱动上皮细胞过度增殖；
上游机制：IL-13 → PI3K-AKT通路 → FOXM1 这条信号轴在EoE上皮损伤中起关键作用；
图7：FOXM1 调控食管上皮增殖 - 分化梯度的作用机制示意图。
图8：FOXM1 在食管上皮中的上游作用机制示意图。
研究结论与展望
结论：本研究证实，FOXM1是介导嗜酸性食管炎（EoE）上皮损伤的关键转录调控因子，是连接IL-13驱动免疫炎症与食管上皮病理重塑的关键分子开关。抑制FOXM1可恢复上皮分化、减少上皮异常增殖、修复屏障完整性，并减轻炎症反应。同时实现“修复上皮屏障”和“抑制局部炎症”的双重治疗效果。
临床意义：靶向抑制 FOXM1 为恢复嗜酸性食管炎（EoE）上皮稳态、减轻炎症提供了全新治疗策略。该疗法可同时改善上皮功能紊乱与免疫失调的双重病理异常，有望为后续靶向药物研发提供方向，并改善患者预后。特别是对现有抗炎治疗反应不佳或存在持续上皮损伤的患者，提供了一种极具前景的治疗策略。
展望：未来需要进一步深入评估FOXM1抑制剂的安全性和有效性，这种“上皮-免疫”双管齐下的策略可能为过敏性疾病治疗开辟新方向。
相关细胞因子
IL-13：IL-13是EoE中驱动上皮重构的核心细胞因子
主要发现：IL-13刺激能显著上调食管上皮细胞中FOXM1的表达（图2）；
信号通路：IL-13非经典地激活了PI3K-AKT信号通路，进而上调FOXM1，这在EoE中是一个新发现（图8）；
下游炎症效应：IL-13通过STAT6信号诱导CCL26（eotaxin-3）表达，后者是招募嗜酸性粒细胞的关键趋化因子。抑制FOXM1后，STAT6磷酸化水平降低，CCL26表达随之下降。
IL-13诱导模型：
细胞系：EPC2-hTERT（永生化的人正常食管上皮细胞）；
原代细胞：患者来源的食管上皮细胞（包括活动期和非活动期EoE患者）；