做DC细胞诱导的小伙伴看过来：GM-CSF诱导造模方案汇总

DC 和巨噬细胞的都懂，GM-CSF 加多少真的是门玄学。

10、20、25、40、50 ng/mL……每个体系不一样，换液时间还各说各话，翻文献翻到凌晨。

为此我们把 16 篇文献的条件拆出来做了横向对照，浓度从 10 到 50 ng/mL、从单独用 GM-CSF 到各种成熟 cocktail 都覆盖了，往下看（电脑端查阅效果更佳）。

1 GM-CSF 单独诱导不添加 IL-4 的经典方案

用量	诱导模型	作用细胞	关键条件
20 ng/mL	小鼠 GM-CSF-BMDC	小鼠骨髓细胞	持续培养约 8 d，得到 CD11c+ DC-like cells，属经典小鼠 BMDC 体系
40 ng/mL	小鼠髓系 DC	小鼠骨髓 DC precursors	2×10⁵ cells/mL；第 3 天补含 GM-CSF 培养液，第 6 天换 1/3 液；5 ng/mL CpG 过夜刺激促成熟
25 ng/mL	GM-BMDC / GM-BMM 混合体系	C57BL/6J 骨髓细胞	10⁶ cells/mL，培养 7 d，第 3 天换液一次；可分出表型不同的 DC 与 macrophage
20 ng/mL	BMDC 标准化培养	小鼠骨髓细胞	培养 6 d，第 2、4 天换液
10 ng/mL	早期 BM-derived DC / MDSC-like	小鼠骨髓细胞	单独 10 ng/mL，或 10 ng/mL + IL-4 5 ng/mL；培养 3–7 d，早期即出现 CD11c+ DC，髓系异质性明显
50 ng/mL	GM-CSF macrophage / MDM	人外周血单核细胞	培养 7 d，得到单核来源巨噬细胞
10 ng/mL	GM-CSF macrophage	人外周血单核细胞	培养至 day 14，细胞呈阿米巴样形态

共 7 条培养条件｜文献报道条件，仅供科研参考

2 GM-CSF + IL-4 及成熟 / 特殊亚群方案含 cocktail 成熟、Langerhans 样 DC、IL-15 DC

用量	诱导模型	作用细胞	关键条件
300 U/mL + IL-4 120 U/mL	未成熟单核来源 DC	人 CD14+ 单核细胞	培养 7 d，每隔一天更换一半培养基
20 ng/mL + IL-4 10 ng/mL	小鼠 BMDC	小鼠骨髓单个核细胞	约 7–8 d 出现典型 DC 形态，以及 CD11c / CD80 / CD86 / MHC-II 表型
1000 U/mL + IL-4 500 U/mL 后加 LPS	mature DC	人 / 小鼠 GM-CSF + IL-4 来源 DC	先得到 immature DC，再用 LPS 促成熟；常用 CD80 / CD83 / CD86、MHC-II 与细胞因子作为分析指标
100 ng/mL + IL-4 10 ng/mL 后加 TNF-α	mature moDC	人 CD14+ 单核细胞	分化约 6 d，再加 TNF-α 24 h，成熟度进一步提升
1000 U/mL + IL-4 500 U/mL 后加 cocktail	经典 cocktail 成熟 moDC	人单核细胞	先 GM-CSF + IL-4 分化，再用 cocktail（TNF-α 50 ng/mL + IL-1β 10 ng/mL + IL-6 100 ng/mL + PGE2 1 μg/mL）促成熟，属参考度较高的成熟 DC 体系
250 ng/mL + IL-4 100 ng/mL + TGF-β1	Langerhans cell-like DC	人 CD14+ 单核细胞	培养 5–7 d，出现 CD1a、E-cadherin、CLA 等 LC 相关表型，并可观察到 Birbeck granules
100 ng/mL + IL-4 10 ng/mL + TGF-β1 10 ng/mL 再加 TNF-α	增强型 moLC	人单核细胞	在 TGF-β1 基础上加 TNF-α，可进一步增强 Langerin 表达、降低 DC-SIGN
100 ng/mL + IL-15 200 ng/mL	IL-15 DC / Langerhans-like DC	人 CD14+ 单核细胞	培养 6 d，可得到 Langerin、E-cadherin / CCR6 特征较明显的一群 DC
800 IU/mL + IL-15 200 ng/mL	短期 IL-15-DC	人 CD14+ 单核细胞	短期培养约 2 d 得到 immature IL-15 DC，后续可继续成熟；对照体系为 800 IU/mL GM-CSF + 20 ng/mL IL-4

共 9 条培养条件｜文献报道条件，仅供科研参考

◆ 划重点 ◆

其实没有标准答案，只有适配你体系的浓度。

▪ 小鼠 BMDC 里 20 ng/mL 出现的频率比较高；

▪ 想同时拿到 DC 和 macrophage，可以试试 25 ng/mL 的混合体系；

▪ 人的单核来源细胞，低剂量偏长期培养、50 ng/mL 更常见的是 7 天方案；

▪ 加不加 IL-4，取决于你下游要看什么表型。

以上都是文献报道的培养条件，仅供科研参考。血清批次、细胞状态、培养箱环境都会影响结果，建议先做小规模预实验摸条件，再放大。

做DC细胞诱导的小伙伴看过来：GM-CSF诱导造模方案汇总

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