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SCF 造模方案汇总:8 大应用方向 · 11 套文献验证方案,一篇查全

SCF 造模方案汇总
8 大应用方向 · 11 套文献验证方案,一篇查全

01  SCF 是干什么的

SCF 又叫 KIT 配体(KITLG),通过结合 KIT 受体(c-Kit/CD117)调控细胞存活、增殖、分化与迁移。在造血干/祖细胞维持、肥大细胞发育、黑色素细胞功能等方向都有明确作用。
02  为什么 SCF 能起作用

SCF 的效果,来自它与 KIT 受体之间那条清晰的信号通路。SCF 与 KIT 结合后,会促使两个 KIT 受体形成二聚体,随后受体发生自磷酸化,像给下游装上了「接驳口」,一连串信号蛋白依次被募集、激活。
通路激活后,主要走四条信号轴:PI3K/AKT;RAS/RAF/MEK/ERK;PLCγ 与 SRC;JAK/STAT。这正是 SCF 能在造模中发挥作用的底层逻辑:
●对造血干/祖细胞,它通过 PI3K/AKT 维持存活、通过 MAPK 支持增殖,所以几乎所有 HSC/HSPC 扩增体系都离不开它;
●对肥大细胞,SCF/KIT 是其发育、成熟与组织驻留的关键调节系统,因此是肥大细胞体外培养的核心因子;
●而且这些通路之间存在交叉调控,SCF 与 IL-3、TPO、FLT3L 等因子搭配时,信号会相互叠加、协同,这也是为什么它几乎总是「组队出场」。
SCF 下达指令 → KIT 接收 → 四条信号轴执行
简单说:细胞是活下来、长起来还是分化掉,取决于指令怎么组合。
03  应用方向与文献方案

造血方向
① 巨核细胞分化
因子组合SCF(25 ng/mL)+ TPO(20 ng/mL)→ 6 天,换液一次;TPO(50 ng/mL)单独处理 7 天得成熟 MKs
作用细胞人脐带血来源 CD34⁺ 造血干细胞(HSC)
方案要点诱导巨核细胞分化,获得成熟巨核细胞
 DOI: 10.21769/BioProtoc.5822
② 具有移植重建能力的 HSC 扩增
因子组合SCF(100 ng/mL)+ FLT3L(100 ng/mL)+ TPO(10 ng/mL)+ IL-6/sIL-6R(100 ng/mL),体外培养 7 天
作用细胞人脐带血 CD34⁺ 细胞
方案要点培养后移植至 NOD/SCID 小鼠,评价人源造血细胞植入及多谱系重建能力
 doi: 10.1172/JCI8583
③ 人脐带血 HSPC 扩增
因子组合SCF + FLT3L + TPO(无血清体系中优化三因子组合与浓度)
作用细胞人脐带血 HSPC
方案要点检测 CD34⁺ 细胞扩增及集落形成能力
 doi: 10.3389/fbioe.2020.573282
④ 人胎肝造血祖细胞扩增(五因子)
因子组合SCF(100 ng/mL)+ FLT3L(100 ng/mL)+ IL-6(20 ng/mL)+ EPO(2 U/mL)+ GM-CSF(200 U/mL),较长时间培养
作用细胞人胎肝造血祖细胞(FL-HSPC)
方案要点观察有核细胞扩增和 CD34 表型变化
 doi: 10.1038/s41598-021-91272-6
⑤ 人脐带血造血前体细胞培养
因子组合SCF(10 ng/mL)+ IL-3 + IL-6(100 ng/mL)+ IL-1β(3 ng/mL)+ EPO(1 U/mL)
作用细胞人脐带血(UCB)来源造血前体细胞
方案要点作为多因子培养条件之一,研究不同培养环境对造血前体细胞扩增的影响
 doi: 10.1371/journal.pone.0015689
⑥ 人脐带血 CD34⁺ 细胞多髓系分化
因子组合SCF + TPO + FLT3L + IL-3 先刺激扩增,后续加入 EPO 等分化因子
作用细胞人脐带血 CD34⁺ 细胞
方案要点先扩增祖细胞,再诱导红系、巨核系及其他髓系细胞形成
 doi: 10.3791/59836
肥大细胞方向
⑦ 小鼠 BMMC 生长
因子组合IL-3(30 ng/mL)+ SCF(100 ng/mL),培养 4–6 周
作用细胞小鼠骨髓来源肥大细胞(BMMC)
方案要点比较 SCF / IL-3 单独与联合培养:SCF 单独支持部分细胞生长,但产量较低且不稳定
 doi: 10.4049/jimmunol.1103366
⑧ 人 CD34⁺ 来源肥大细胞分化
因子组合第 1 周 IL-3(30 ng/mL),后续 SCF(100 ng/mL)+ IL-6(100 ng/mL)维持
作用细胞人 CD34⁺ 祖细胞
方案要点获得用于功能实验的人源肥大细胞
 doi: 10.1002/0471142735.im0737s90
⑨ 人肠道成熟肥大细胞增殖
因子组合SCF(25 ng/mL)± IL-4(10 ng/mL)
作用细胞人肠道肥大细胞(MC)
方案要点比较单独及联合处理对增殖的影响,并结合 IgE 受体交联研究介质释放
 doi: 10.1073/pnas.96.14.8080
⑩ 小鼠黏膜型肥大细胞特征诱导
因子组合IL-9(10 ng/mL)+ SCF(30 ng/mL)
作用细胞骨髓来源培养肥大细胞(BMMC)
方案要点检测 Mcpt1、Mcpt2 等黏膜型肥大细胞相关标志物
 doi: 10.3390/ijms21010236
⑪ 腹膜细胞源性肥大细胞(PCMC)
因子组合IL-3(10 ng/mL)+ SCF(30 ng/mL),5 mL 培养基(每两只小鼠 / T25 瓶)
作用细胞小鼠腹膜来源细胞
方案要点第 3、6 天换液,9–10 天收获 PCMCs
 DOI: 10.21769/BioProtoc.1052
04  几个容易踩的点

●浓度不是统一的:同样是 SCF,造血扩增常用 100 ng/mL,巨核分化和肠道 MC 增殖常用 25 ng/mL。
●SCF 很少单打独斗:多数模型需要 IL-3、TPO、FLT3L 等协同,单用效果有限。
●换液节奏影响结果:PCMC 方案明确第 3、6 天换液,BMMC 需要 4–6 周持续培养。
●注意细胞来源差异:人源与鼠源方案不能直接互套。