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【科研指南】你知道有哪些TNF-α 的常见造模方式吗?对着这张表做!

TNF‑α 作为核心促炎细胞因子,广泛参与炎症、免疫及多种疾病模型构建,是体外细胞造模最常用的刺激因子。但不同细胞、不同实验目的下,TNF‑α 的造模浓度、处理时长、造模方案差异很大,参考文献筛选费时费力。赛因生物整理了多篇文献中 TNF‑α 经典造模方案,帮大家快速参考,少走实验弯路。

细胞因子

诱导模型

作用细胞

实验描述

文章来源

TNF-α

激活内皮细胞

人脐静脉内皮细胞 HUVEC

10 ng/mL TNF-α 刺激 HUVEC 24 h,激活 NF-κB 通路,上调 ICAM-1VCAM-1 黏附分子,构建内皮炎症激活模型

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8082146/

激活内皮细胞

人脐静脉内皮细胞 HUVEC

20 ng/mL TNF-α 处理 HUVEC 48 h,诱导内皮屏障损伤、炎症因子 IL-6CXCL8 大量分泌

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10929945/

神经炎症造模

小鼠 BV2 小胶质细胞

20 ng/mL TNF-α 单独刺激 BV2 小胶质细胞 24 h,诱导 M1 型极化,iNOSTNF-αIL-1β 显著上调

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10566197/

构建 RA-FLS 炎症模型

类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 RA-FLS

10 ng/mL 重组人 TNF-α 刺激 RA-FLS 24 h,诱导 IL-6MMP-3RANKL 高表达,模拟类风湿关节滑膜炎症

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8756401/

构建 RA-FLS 炎症模型

人原代 RA-FLS

20 ng/mL TNF-α 处理 RA-FLS 24 h,促进细胞增殖、侵袭及促炎趋化因子释放

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC4549173/

TNF-α+IFN-γ

炎症性肠病模型

人诱导多能干细胞来源结肠类器官

30 ng/mL TNF-α30 ng/mL IFN-γ10 ng/mL IL-1β联合治疗8天,模拟炎症性肠病肠组织炎症微环境

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10498420/

血管内皮损伤模型

人主动脉内皮 HAEC 细胞

5 ng/mL TNF-α+100 IU/mL IFN-γ 共细胞 14h-20h,诱导内皮氧化应激、屏障通透性升高,模拟血管炎症损伤

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8082146/

血管内皮损伤模型

HUVEC细胞

50 ng/mL TNF-α+5 ug/mL IFN-γ 处理72 h

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11353037/

激活小胶质细胞

原代大鼠小胶质细胞

20 ng/mL TNF-α+50 ng/mL IFN-γ 联合刺激 24 h,诱导小胶质细胞 M1 活化,大量释放 NO、促炎因子

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC6066613/

TNF-α+IL-1β

骨关节炎

C28/I2 人永生化软骨细胞

10 ng/mL TNF-α+10 ng/mL IL-1β 联合刺激 C28/I2 48 h,细胞呈梭形去分化,MMP13/ADAMTS5 升高、Col2a1/Aggrecan 降低,体外 OA 模型

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8724558/

类风湿滑膜细胞

SW982 人滑膜肉瘤细胞(滑膜模型替代)

10 ng/mL TNF-α+10 ng/mL IL-1β 联合刺激 SW982 24 h,激活 NF-κB 通路,大量分泌促炎介质

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9018200/

星形胶质细胞活化

 iPSC 来源星形胶质细胞

10 ng/mL TNF-α+10 ng/mL IL-1β 持续处理 7 d,诱导反应性星形胶质细胞,GFAPVimentin 表达显著上升

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC6858358/

星形胶质细胞活化

小鼠 C8-D1A 星形胶质细胞系

10 μg/L TNF-α+10 μg/L IL-1β 无血清培养刺激 48 hGFAP 升高,建立体外星形胶质活化神经炎症模型

https://dianda.cqvip.com/Qikan/Article/Detail?id=7107975960

肾小管损伤模型

 HK-2 近端肾小管上皮细胞

5 ng/mL TNF-α+5 ng/mL IL-1β 共刺激 HK-2 48 h,激活 NLRP3 炎症小体,诱导肾小管上皮炎症损伤、凋亡

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11749467/

肾小管损伤模型

原代小鼠肾小管上皮细胞

10 ng/mL TNF-α+10 ng/mL IL-1β 处理原代肾小管上皮 24 h,促炎因子 CXCL5IL-6 mRNA 显著上调,模拟肾炎上皮损伤

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10878891/

TNF-α+IL-17A

角质形成细胞炎症模型

HaCaT 人永生化角质形成细胞

50 ng/mL TNF-α+50 ng/mL IL-17A 联合刺激 HaCaT 24 h,上调 IL-23KRT16,体外模拟银屑病表皮炎症表型

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC7856048/

角质形成细胞炎症模型

人原代皮肤角质形成细胞

20 ng/mL TNF-α+20 ng/mL IL-17A 共处理原代角质细胞 48 h,促进表皮过度增殖、趋化因子大量分泌

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC8616089/

成纤维滑膜细胞活化实验

类风湿关节炎 RA-FLS 细胞

10 ng/mL TNF-α+25 ng/mL IL-17A 共刺激 RA-FLS 24 h,协同诱导 RANKLMMP1 表达,促进骨侵蚀相关因子释放

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10049180/

成纤维滑膜细胞活化实验

人滑膜成纤维细胞

20 ng/mL TNF-α+50 ng/mL IL-17A 孵育 48 h,增强细胞迁移能力与促炎因子分泌,模拟 RA 滑膜活化

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC2745795/

TNF-α+TGF-β1

上皮间质转化(EMT

 HK-2 肾小管上皮细胞

10 ng/mL TNF-α+5 ng/mL TGF-β1 共刺激 HK-2 48 h,细胞由铺路石变为梭形,E-cadherin 下降、α-SMAVimentin 升高,诱导肾小管 EMT

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9330665/

上皮间质转化(EMT

大鼠 NRK-52E 肾小管上皮细胞

5 ng/mL TNF-α+5 ng/mL TGF-β1 联合处理 48 h,诱导上皮间质转化,纤维化标志物胶原 I/III 大量沉积

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10342099/

器官纤维化

人肝星状细胞 HSC

10 ng/mL TNF-α+10 ng/mL TGF-β1 刺激 HSC 72 h,促进胶原合成、肌成纤维细胞活化,体外肝纤维化模型

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC7618091/

器官纤维化

肾间质成纤维细胞

5 ng/mL TNF-α+5 ng/mL TGF-β1 共孵育 72 h,持续放大炎症 纤维化环路,模拟慢性肾病肾间质纤维化

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC12913155/

慢性炎症介导瘢痕化模型

人皮肤成纤维细胞

10 ng/mL TNF-α+5 ng/mL TGF-β1 处理皮肤成纤维细胞 48 h,促进胶原过度分泌、细胞外基质堆积,模拟增生性瘢痕体外模型

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC11184829/

慢性炎症介导瘢痕化模型

人真皮成纤维细胞

20 ng/mL TNF-α+10 ng/mL TGF-β1 联合刺激 72 h,上调纤连蛋白、型胶原,炎症持续介导纤维化瘢痕表型

https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC9426130/