做MSC 原代分离、扩增、三向分化、免疫功能实验总踩坑?
细胞贴壁差、扩增慢、干性丢失、分化诱导不出阳性结果…
绝大多数问题根源都在细胞因子搭配和浓度上!
今天我们来分享一下MSC培养常见的细胞因子及其别称~
MSC研究相关常见细胞因子
骨髓 / 脂肪 / 脐带 / 牙髓四种常见 MSC,记牢 3 条鉴定标准:
✅️ 贴壁生长;
✅️CD105/73/90 阳性,CD45,CD34,CD14或CD11b,CD79a或CD19以及HLA-DR阴性;
✅️ bFGF (FGF-2):提升至 30%-50% 原代贴壁率,抑制早期凋亡;
✅️ TGF-β:搭建细胞微环境,防传代早衰、自发分化;
✅️ IGF-1+PDGF 联用缩短倍增时间,维持干性标志物;
✅️ 脂肪源 MSC 优先加 EGF;
✅️ 骨髓 MSC 可添加 SCF 提升增殖与干性维持效果;
再也不怕细胞提前老化丢失干性!
✅️ 成骨:BMP2 为主,TGF-β+IGF-1 辅助,联合抗坏血酸和β甘油磷酸溶液,14 天钙结节;
✅️ 成脂:地塞米松、吲哚美素、胰岛素,IBMX,21 天油红 O 阳性;
✅️ 成软骨:TGF-β3 为主、BMPs 协同,添加抗坏血酸、地塞米松pellet 微球培养,4 周成型软骨组织;
✅️ TNF-α:诱导 #IL-6/IL-10,增强免疫抑制;
✅️ IFN-γ:上调 IDO,强效抑制 T 细胞,免疫研究刚需;
✅️ VEGF:提升血管生成能力,适配血管化组织工程;
细胞因子常见别称
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